Bathar

Chan eil e furasta an dòigh anns am bi buaidhean mùthaidhean aig an aon àm a’ tighinn còmhla gus gnìomhachd enzymatic atharrachadh leis nach eil na buaidhean sin an-còmhnaidh nan cuir-ris ann an dòigh sreathach.Mar sin, faodaidh comharrachadh buaidh mùthaidhean aig an aon àm de fhuigheall aminoideach a tha a’ ceangal an t-substrate cur gu mòr ri tuigse air sònrachas substrate enzymes.Anns a ’beta-glycosidase bho Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), bidh an dà chuid fuigheall Q39 agus E451 ag eadar-obrachadh leis an t-substrate agus tha seo riatanach airson sònrachas substrate a mhìneachadh.Chaidh mutants dùbailte de Sfbetagly (A451E39, S451E39 agus S451N39) ullachadh le mutagenesis air a stiùireadh leis an làrach, air a chuir an cèill ann am bacteria agus air a ghlanadh le bhith a’ cleachdadh cromatagrafaidheachd dàimh.Bha na h-enzyman sin air an comharrachadh le bhith a’ cleachdadh p-nitrophenyl beta-galactoside agus p-nitrophenyl beta-fucoside mar fho-stratan.Chaidh an co-mheas k cat / Km airson mutants singilte is dùbailte de Sfbetagly anns a bheil mùthaidhean air an stiùireadh leis an làrach aig dreuchdan Q39 agus E451 a chleachdadh gus sealltainn gu bheil a’ bhuaidh air lùth an-asgaidh biodag ESdouble (iom-fhillte stàite enzyme-transition) de na mùthaidhean dùbailte (Gdouble daggerxy) suim nam buaidhean a thig bho na mùthaidhean singilte (Gdouble daggerx agus Gdouble biodag).Tha an eadar-dhealachadh seo ann am biodag Gdouble a’ nochdadh gu bheil buaidh nam mùthaidhean singilte gu ìre a’ dol an lùib a chèile.Mar sin, chan eil a’ bhuaidh chumanta seo a’ cunntadh ach aon turas ann an Gdouble daggerxy.Tha dàta criostalach air beta-glycosidases a’ nochdadh gu bheil ceangal bidentate hydrogen anns a bheil fuigheall Q39 agus E451 agus an aon bhuidheann hydroxyl den fho-strat.Mar sin, tha an dà chuid dàta thermodynamic agus crystallographic a’ nochdadh gu bheil fuigheall Q39 agus E451 a’ toirt buaidh dha chèile air an eadar-obrachadh fa leth leis an t-substrate.