Bathar

Chaidh ceistean a thogail gu tric o chionn ghoirid: 1. Carson a dh'fhaodar an deuchainn ONPG a chleachdadh gus eadar-dhealachadh a dhèanamh air dàil coipeadh lactose?2. Carson a tha an inbhe nàiseanta ag ràdh gu feumar iarann ​​​​trisaccharide sodium chloride 3% (no iarann ​​​​trisaccharide) a chleachdadh airson deuchainn ONPG?3. Airson Vibrio parahaemolyticus, nuair a thathar a' dèanamh deuchainn OPNG, carson a bu chòir toluene a bhith air a chur ris dropwise a rèir na h-ìre?Dè an gnìomh a th’ ann?

Tha a’ chompanaidh againn air tòrr fiosrachaidh ath-sgrùdadh, air geàrr-chunntas a dhèanamh air, agus air a roinn leat gu h-ìosal:

Prionnsabal: Is e o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside an t-ainm Sìneach air ONPG.Faodar ONPG a hydrolyzed a-steach do galactose agus o-nitrophenol buidhe (ONP) le β-galactosidase, agus mar sin faodar gnìomhachd β-galactosidase a lorg le atharrachadh dath meadhan cultair.

Is e siùcar a th’ ann an lactose a dh’ fheumas a’ mhòr-chuid de meanbh-fhàs-bheairtean a lorg.Feumaidh an metabolism aige dà enzymes, is e aon chealla permease, bidh lactose a ’dol a-steach do cheallan fo ghnìomhachd permease;Is e am fear eile β-galactosidase, a bhios a’ hydrolyzes lactose gu galactose.Lactose agus glucose.Faodaidh β-Galactosidase cuideachd a bhith ag obair gu dìreach air ONPG gus a uisgeachadh gu galactose agus o-nitrophenol buidhe (ONP).Faodar a dhèanamh ann an 24h, eadhon le dàil lactose fermenters.Mar sin, tha e a’ mìneachadh na toraidhean amharc bho bhith a’ togail cultar 1 bhon agar slant agus ga chuir ann an cearcall slàn aig 36 ° C airson 1-3h agus 24h.Ma thèid β-galactosidase a thoirt a-mach, tionndaidhidh e buidhe ann an 1-3h, mura h-eil an leithid de enzyme ann, chan atharraich e dath ann an 24h.

A rèir an dà enzymes gu h-àrd, faodar meanbh-fhàs-bheairtean a roinn anns na roinnean a leanas:

1 lactose-fermenting (18-24 uairean) bacteria le permease agus β-galactosidase P + G +;

2 Aiseagan lactose dàil (a’ toirt nas fhaide na 24 uairean) gun permease ach aig a bheil galactosidase: P- G+.

3 Aiseagan neo-lactose aig a bheil an dà chuid permease agus galactosidase: P- G-.

Faodar an deuchainn ONPG a chleachdadh gus bacteria lactose-lag-fermenting (PG +) a dhealachadh bho bacteria lactose nach eil ag aiseag (PG-), leithid:

1 Dèan eadar-dhealachadh eadar fermenters lactose anmoch (PG+) bho fermenters neo-lactose (PG-).

(a) Citrobacter (+) agus Salmonella arizonae (+) bho Salmonella (-).

(b) Escherichia coli (+) bho Shigella sonnei (-).

Carson a chaidh an assay ONPG a dhèanamh a’ cleachdadh cultar thar oidhche air 3% sodium chloride ferric trisaccharide (trisaccharide iarainn)?Tha a 'chompanaidh againn air co-chomhairle a chumail ri mòran fiosrachaidh, ach chan eil aithris soilleir ann.Air làrach-lìn an FDA a-mhàin, tha e sgrìobhte “Gun deuchainn a dhèanamh air cultaran inoculate air slants agar iarann ​​​​siùcair trì-fhillte agus goir airson 18 h aig 37 ° C (no teòthachd iomchaidh eile, ma tha feum air). . faodar % lactose a chleachdadh cuideachd."a’ ciallachadh: chaidh na bacteria deuchainn a thoirt a-steach air meadhan iarann ​​​​trisaccharide agus àiteach aig 37 ° C airson 18h.Gabhar cuideachd ri slants agar beathachaidh (no meadhan eile) anns a bheil 1% lactose.Mar sin, tha e air a dhearbhadh gu bheil lactose anns a 'mheadhan iarainn trisaccharide.Às deidh fàs thar oidhche, tha na bacteria air β-galactosidase gnìomhach math a thoirt gu buil.Le bhith a’ cleachdadh bacteria mar sin, faodaidh ONPG a bhith air a lobhadh le β-galactosidase nas luaithe.Tha an iongantas deuchainneach air a nochdadh nas luaithe agus nas fheàrr.A bharrachd air an sin, tha cuir a-steach dropwise de toluene agus amar uisge airson 5 min uile gus β-galactosidase a leigeil ma sgaoil gu tur.