Bathar

Tha am pròtain ORF45 de herpesvirus co-cheangailte ri sarcoma Kaposi (KSHV) na phròtain teasachadh tràth sa bhad sònraichte le gammaherpesvirus.Tha na sgrùdaidhean a rinn sinn roimhe air na prìomh dhleastanasan aige fhoillseachadh anns gach cuid ìrean tràth agus fadalach de ghalar KSHV.Anns an sgrùdadh seo, rinn sinn sgrùdadh air eadar-obrachadh ORF45 a’ cleachdadh pannal de antibodies monoclonal.A bharrachd air na pròtanan kinase riaghlaichte extracellular (ERK) agus p90 ribosomal S6 kinase (RSK) a chaidh a chomharrachadh roimhe, lorg sinn grunn phròtainean copurified eile, a’ toirt a-steach feadhainn fhollaiseach de ∼38 kDa agus ∼130 kDa.Nochd spectrometry mòr gu bheil am pròtain 38-kDa viral ORF33 agus is e am pròtain 130-kDa ceallach USP7 (protease sònraichte ubiquitin 7).Mhpaich sinn an raon ceangail ORF33 gu na h-amino-aigéid carboxyl-terminal 19 (aa) de ORF45 agus an raon ceangail USP7 ris an motif co-aontachd a chaidh aithris ann am meadhan sgìre ORF45.A ’cleachdadh staining immunofluorescence, chunnaic sinn colocalization de ORF45 le ORF33 no USP7 an dà chuid fo ions condit transfected agus ann an ceallan le galair KSHV.A bharrachd air an sin, mhothaich sinn ath-ghluasad a bha an urra ri ORF45 de chuibhreann de ORF33 / USP7 bhon niuclas chun cytoplasm.Fhuair sinn a-mach gun do dh’ adhbhraich ORF45 àrdachadh ann an cruinneachadh pròtain ORF33 a chaidh a chuir às ma chaidh an raon ceangail ORF33- no USP7 ann an ORF45 a dhubhadh às.A bharrachd air an sin, lùghdaich cuir às don cheann-uidhe carboxyl glèidhte de ORF45 ann an genoma KSHV gu mòr an ìre de phròtain ORF33 ann an ceallan le galair KSHV agus chuir e às do chinneasachadh virions ginealach.Còmhla, chan e a-mhàin gu bheil na toraidhean againn a’ nochdadh co-phàirtean ùra den eadar-obrachadh ORF45, ach tha iad cuideachd a’ sealltainn gu bheil an eadar-obrachadh am measg nam pròtanan sin deatamach airson ath-riochdachadh lytic KSHV.Tha KSHV ORF45 na phròtain ioma-ghnìomhach a tha riatanach airson ath-riochdachadh lytic KSHV, ach chan eil e soilleir dè na h-innealan ceart a bhios ORF45 a’ coileanadh a dhleastanasan riatanach.Nochd na sgrùdaidhean a rinn sinn roimhe gu bheil a h-uile pr otein ORF45 ann an ceallan ann an iom-fhilltean cuideam àrd-moileciuil.Mar sin dh’ fheuch sinn ri eadar-obrachadh ORF45 a chomharrachadh gus seallaidhean a thoirt seachad air na dreuchdan aige aig àm ath-riochdachadh lytic.A’ cleachdadh pannal de antibodies monoclonal, rinn sinn sgrùdadh air an eadar-obrachadh ORF45 ann an ceallan le galair KSHV.Chomharraich sinn dà chom-pàirtiche ceangail ùr de ORF45: am pròtain viral ORF33 agus protease sònraichte ubiquitin ceallach 7 (USP7).Tha sinn a’ sealltainn cuideachd gu bheil an eadar-obrachadh eadar ORF45 agus ORF33 deatamach airson cinneasachadh èifeachdach de ghràineanan viral KSHV, a’ moladh gum faodadh an eadar-theachd cuimsichte leis an eadar-obrachadh seo a bhith a’ riochdachadh ro-innleachd ùr gus casg a chuir air ath-riochdachadh lytic KSHV.